นโยบายการจัดการความรู้ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ 1.ให้ใช้เครื่องมือการจัดการความรู้ผลักดัน คุณภาพคน และกระบวนทำงาน 2.ส่งเสริมการแลกเปลี่ยนประสบการณ์การทำงาน จากหน้างาน 3.ส่งเสริมให้มีเวทีเรียนรู้ร่วมกัน

DaDa
Ico64
Songsuda Promthong
นักวิทยาศาสตร์
ศูนย์เครื่องมือวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์
เครือข่าย
สมาชิก · ติดตาม: 0 · ผู้ติดตาม: 5

อ่าน: 2396
ความเห็น: 14

เหตุเกิดจากน้ำและบัฟเฟอร์

ตัวทำละลายเคลื่อนที่คือน้ำที่มีกรดอะซิติกผสมอยู่ โดยปกติการใช้สารที่เป็นกรด บัฟเฟอร์ น้ำ จำเป็นต้อง เตรียมใหม่ๆ ไม่เตรียมทิ้งไว้นานๆ เพราะจะมีผลให้ค่า pH และคุณสมบัติ ทางเคมีเปลี่ยนไป จึงมีผลให้การแยกของลูกค้าในวันนั้นไม่สามารถตรวจวัดสัญญาณได้เลย

เมื่อสัปดาห์ที่ผ่านมา มีลูกค้ามาใช้เครื่อง HPLC1 ด้วยตนเองที่ศูนย์เครื่องมือฯ ลูกค้าพบว่า

1. ความดัน (Pressure) ของเครื่องต่ำกว่าปกติที่เจอมาใช้ ปกติสภาวะที่ใช้ ความดันประมาณ 60-70 bar แต่ วันนี้ ความดันแค่ 40 กว่าๆ เท่านั้น

2. เมื่อสั่ง RUN สารมาตรฐานไม่เจอพีค ของสารเลย และลองสั่ง RUN ตัวอย่างก็เช่นเดียวกัน ทั้งๆที่ก่อนหน้านั้น (1 สัปดาห์ก่อนหน้า) ยังเจอพีคที่ต้องการฉีดสารมาตรฐานแล้วไม่เห็นสัญญาณ โครมาโตแกรม หรือ พีค ของสารมาตรฐาน หรือตัวอย่างเลย ดังรูป

 เลยมาแจ้ง ดาดา ว่า เครื่องมีปัญหา

ดาดา จึงเข้าไปดู

อันดับแรก

1.               ดาดา เช็คว่า สาย Capillary tube ที่ต่อจากคอลัมน์สู่ Detector ถุกต้องหรือไม่ พบว่า ต่อเข้าถูกต้องกับ Detector ที่ใช้งานคือ FLD (Fluorescence Detector) จึงตัดปัญหาเรื่องสัญญาณไม่พบ จากบันทึก Chromatogram ที่หายไป

        2.               ดาดา เช็ค purge valve พบว่าลูกค้าปิด purge valve ผลไม่สนิททำให้ ความดัน    น้อยกว่าเดิม เมื่อปิด purge valve สนิท พบว่าได้ความดันกลับมาเท่าเดิมจากที่ลูกค้าเคยใช้ (ประมาณ 60-70 bar) ดาดา เลยให้ลูกค้าลองฉีดสารมาตรฐานอีกครั้ง แต่ พบว่า ยังคงไม่เห็นสัญญาณโครมาโตแกรมเช่นเดิม.....งง.... 

สอบถามลูกค้าอีกครั้งว่า สภาวะที่ใช้เหมือนเดิมหรือเปล่า ลูกค้า ตอบว่า เหมือนเดิม สารมาตรฐานก็เหมือนเดิม เพิ่งเตรียมใหม่เมื่อเช้าก่อนมาใช้เครื่อง และมั่นใจว่าเตรียมถูกต้อง รวมทั้งตัวอย่างก็เช่นกัน ทั้งๆที่ปกติจะมีพีคหลายพีค แต่ก็ไม่เห็นสัญญาณอะไรเลยจากตัวตรวจวัด ...สอบถามต่อ..เรื่องตัวทำละลายเคลื่อนที่ (Mobile phase) ลูกค้าบอกว่าใช้ Acetonitrile HPLC grade และน้ำ ดาดาเลยถามต่อว่า น้ำเตรียมเมื่อไหร่เปลี่ยนใหม่ทุกวันมั้ย ลูกค้าบอกว่า น้ำนี้น้องใช้มาหลายครั้งแล้วเตรียมและใช้มาหลายสัปดาห์แล้ว สัปดาห์ที่แล้วก็ใช้ก็ยังแยกได้เห็นพีคทุกพีคที่มีในตัวอย่างและสารมาตรฐาน จึงได้รู้ว่าน้ำที่ลูกค้าบอกมานั้นมีกรด acetic ผสมอยู่ด้วยและได้เตรียมมาเป็นระยะเวลานานแล้วแต่ยังคงใช้งาน และลุกค้าคิดว่าไม่น่าจะมีปัญหาเพราะเมื่อสัปดาห์ก่อนก็ใช้แต่ยังคงแยกและให้โครมาโตแกรมได้

           นั่นไง.. ดาดาคิดว่าน่าจะเจอเจ้าปัญหาที่ทำให้พีคของารไม่แยกออกมาแล้วล่ะ... 

ดาดาเลยแนะนำลูกค้าว่าสาเหตุน่าจะเกิดจากตัวทำละลายเคลื่อนที่คือน้ำที่มีกรดอะซิติกผสมอยู่ โดยปกติการใช้สารที่เป็นกรด บัฟเฟอร์ น้ำ จำเป็นต้อง เตรียมใหม่ๆ ไม่เตรียมทิ้งไว้นานๆ เพราะจะมีผลให้ค่า pH และคุณสมบัติ ทางเคมีเปลี่ยนไป จึงมีผลให้การแยกของลูกค้าในวันนั้นไม่สามารถตรวจวัดสัญญาณได้เลย

  

ข้อมูลบางส่วนจาก data sheet ของคอลัมน์ยี่ห้อหนึ่ง

 แต่ลูกค้าก็ไม่มั่นใจ คิดว่าไม่น่าจะเกี่ยวกัน อยากให้ศูนย์เครื่องมือฯ เช็คดูเครื่องมีปัญหาหรือเปล่าและเพื่อการยืนยันความต้องการของลูกค้าและรีเช็คตัวเองด้วยว่าเครื่องมือยังคงใช้งานได้จริงๆ ดาดาก็เลยจัดให้

โดย ดาดาเลือก Method ที่ใช้สอบเทียบเครื่อง HPLC1 มาใช้ในการรีเช็คพบว่า ได้สัญญาณโครมาโตแกรมทุกพีคของสารที่ใช้สอบเทียบดังรูป

  

เมื่อผลออกมาว่าเครื่องมือยังคงสามารถใช้งานได้ ดาดา จึงได้แจ้งผลการทดสอบของดาดาให้ลูกค้าทราบ

 

3.               ลูกค้าจึงเตรียมตัวทำลายน้ำที่มีกรดอะซิติกผสมอยู่ มาทดสอบใหม่อีกครั้ง พบว่า สามารถแยกสารมาตรฐานและตัวอย่างได้ตามที่ต้องการ ดังรูป

 

.....................................................................................................................................

หมวดหมู่บันทึก: พัฒนางานประจำ
สัญญาอนุญาต: สงวนสิทธิ์ทุกประการ Copyright
สร้าง: 11 กุมภาพันธ์ 2554 16:03 แก้ไข: 11 กุมภาพันธ์ 2554 17:13 [ แจ้งไม่เหมาะสม ]
ดอกไม้
สมาชิกที่ให้กำลังใจ
 
Facebook
Twitter
Google

บันทึกอื่นๆ

ความเห็น

ขอเป็นกำลังใจให้ DaDa จ๊ะ ผู้ซึ่งเป็นนักวิทย์ที่ดูแลลูกค้าใช้เครื่องด้วยตนเองเหมือนกัน

สงสัยวันนั้นจะอิ่ม   อิอิอิ  อิ่มน้ำรึเปล่า

Ico48
ServiceMan (ความเคลื่อนไหวล่าสุด)
11 กุมภาพันธ์ 2554 17:29
#63609

เยี่ยมยุทธ มากจ้า :)

ผึ้งทอง เตรียม HF 15 % ทิ้งไว้เป็นเดือนแล้ว ถ้าจะใช้ต้องเตรียมใหม่ไหม

นี่แหละ นักวิทยาศาสตร์มืออาชีพ Professional

รายละเอียดเล็กๆ น้อยที่ หลายๆ คนไม่ใส่ใจ คิดว่าไม่สำคัญ แล้วก็พยายามค้นหาเหตุโน่นนี่

ถ้าคิดรอบด้าน ใส่ใจในรายละเอียด ก็ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพให้กับงาน มากขึ้นครับ

เชียร์

เราเอง

.......ไม่เม้นท์ดีกว่า

Ico48
DaDa [IP: 192.168.100.112]
14 กุมภาพันธ์ 2554 10:15
#63648

ขอบคุณทุกความคิดเห็น

ผึ้งทอง ขอแนะนำว่าควรจเตรียมใหม่นะค่ะ

 

Ico48
พี่แกะ [IP: 192.168.100.112]
14 กุมภาพันธ์ 2554 14:52
#63657
บางครั้งถึงกับทำให้ Line filter ตันโดยไม่รู้ตัวด้วยค่ะ
Ico48
DaDa (ความเคลื่อนไหวล่าสุด)
14 กุมภาพันธ์ 2554 16:39
#63661

 

นั่นไง.. ดาดาคิดว่าน่าจะเจอเจ้าปัญหาที่ทำให้พีคของารไม่แยกออกมาแล้วล่ะ... 

ขอแก้ไขคำผิด เป็น

นั่นไง.. ดาดาคิดว่าน่าจะเจอเจ้าปัญหาที่ทำให้พีคของสารไม่แยกออกมาแล้วล่ะ... 

Ico48
DaDa (ความเคลื่อนไหวล่าสุด)
14 กุมภาพันธ์ 2554 16:41
#63662
ขอบคุณสำหรับข้อคิดเห็นของพี่แกะ ค่ะ
Ico48
tiny apple (ความเคลื่อนไหวล่าสุด)
14 กุมภาพันธ์ 2554 17:55
#63668

โอ้ววว พี่ดาดา สุดยอดค่ะ

ข้าน้อยขอคารวะ

เป็นกะลังใจให้สำหรับปัญหาต่อๆ ไป ที่อาจจะเจอนะคะ

Ico48
ไม่ไหวแหละ [IP: 172.28.56.232]
10 ธันวาคม 2555 22:25
#82443

พี่ดาดาเก่งมาเลยค่ะรายละเอียดแม้นเพียงเล็กน้อยก็ยังรู้ได้ ^^ หนูคนนึงค่ะกำลังมีปัญหาเกี่ยวกับ HPLC เหมือนกัน คือ เมื่อหนูฉีด acetonitrile ซึ่งทำหน้าที่เป็นตัวทำละลายของสารที่หนูต้องการวิเคราะห์เพียงอย่างเดียว ผลปรากฏว่าเกิดพีคขึ้นมากหลายตำแหน่ง ทั้งๆที่ก่อนนำมาฉีด หนูได้ทำการกรองและ degas เรียบร้อยแล้ว พี่ดาดาพอจะให้คำแนะนำหนูหน่อยได้มั๊ยค่ะว่าทำไมถึงเป็นแบบนี้

ปล.acetonitrile ที่ใช้เป็น เกรด HPLC และ moblie phase : 70/30 v/v ACN:water

รบกวนด้วยค่ะ

Ico48
DaDa [IP: 192.168.53.71]
11 ธันวาคม 2555 11:43
#82451

อาการ แบบนี้ ยังไม่เคยเจอ มาก่อนค่ะ

แนะนำ

ลอง เช็ค ว่า สาร เกิดการปนเปื้อน จาก ภาชนะ หรือไม่ เตรียมใหม่อีีกครั้ง

หรือ คอลัมน์ มีสิ่งตกค้าง ส่งผลให้ ขณะที่ รัน มี พีค แปลกๆ แสดงออกมาด้วย

หากเป็นเช่นนั้น ควร ล้างคอลัมน์

หรือ อาจะเป็นไปได้ว่า membrane ที่ใช้กรอง ไม่เหมาะสม ( แค่การคาดเดานะค่ะ) เพราะ เคย มีลูกค้าที่มาใช้เครื่องด้วยตนเองที่ศูนย์เครื่องมือฯ มีปัญหาเครือง Mobile phase กรองด้วย membrane 2 ชนิด ด้วยกัน นำ มาใช้กับเครื่อง HPLC ให้ผลไม่เหมือนกัน

จึงจำเป็นต้อง เลือกใช้ membrane ชนิดที่ให้ผลที่ดี ( อันนี้จำไม่ได้แล้วว่า membrane อะไร เนื่องจากเป็นของลูกค้าคนนั้นค่ะ)

ลองดู นะค่ะ

Ico48
อร [IP: 183.89.145.73]
21 พฤษภาคม 2556 23:14
#87829

มีปัญหาเวลารันHPLCแล้วความดันสูงมากค่ะ flowได้แค่ 0.65ml/min เป็นเพราะอะไรค๊ะ ช่วยแนะนำเทคนิคในการกรองสารอย่างถูกวิธีด้วยนะค่ะ และมีคราบหินปูนติดที่ sinter glass ควรล้างด้วยอะไรค๊ะ

ร่วมแสดงความเห็นในหน้านี้

ชื่อ:
อีเมล:
IP แอดเดรส: 34.204.176.125
ข้อความ:  
เรียกเครื่องมือจัดการข้อความ
   
ยกเลิก หรือ